ASTM D4454-85(2009)
Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía

Estándar No.

ASTM D4454-85(2009)

Fecha de publicación

1985

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Ultima versión

ASTM D4454-85(2009)

Alcance

La medición de la densidad bacteriana es generalmente el primer paso para establecer una relación entre las bacterias y otros procesos bioquímicos. Se sabe que el procedimiento clásico de recuento en placa subestima las densidades bacterianas, mientras que el procedimiento microscópico directo de epifluorescencia representa con mayor precisión el número total de células no viables o latentes y viables en una muestra de agua. La técnica de reducción de INT-formazán con naranja de acridina proporciona información sobre las concentraciones totales de bacterias, así como sobre la proporción que respiran activamente y, por lo tanto, participan en procesos degradativos. La técnica de reducción de INT-formazán con naranja de acridina es cuantitativa y precisa. Este procedimiento es ideal para enumerar bacterias pelágicas y epibentónicas en todos los ambientes marinos y de agua dulce. El proceso se puede emplear en estudios de sondeo para caracterizar las densidades y actividades bacteriológicas de las aguas ambientales.1.1 Este método de prueba cubre la detección y enumeración de bacterias acuáticas mediante el uso de un procedimiento de recuento microscópico directo de epifluorescencia de naranja de acridina. Este método de prueba es aplicable a aguas ambientales y aguas potables. 1.2 Ciertos tipos de desechos y otros microorganismos pueden emitir fluorescencia en frotis teñidos con naranja de acridina. 1.3 El procedimiento descrito requiere un microbiólogo o técnico capacitado que sea capaz de distinguir las bacterias de otros cuerpos fluorescentes según su morfología cuando se observan con mayores aumentos. 1.4 El uso de luz brillante permite la diferenciación de bacterias individuales donde se deposita formazán reducido en los extremos polares. 1.5 Se requieren aproximadamente 104 células/ml para la detección mediante este método de prueba. 1.6 El tamaño mínimo de celda que permite la detección de depósitos de formazán está representado por bacterias de 0,4 μm2. 1.7 Los valores indicados en unidades SI deben considerarse estándar. No se incluyen otras unidades de medida en esta norma. 1.8 Esta norma no pretende abordar los problemas de seguridad, si los hubiera, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso.

ASTM D4454-85(2009) Documento de referencia

• ASTM D1129 Terminología estándar relacionada con el agua*， 1999-11-11 Actualizar
• ASTM D1193 Especificación estándar para agua reactiva*， 1999-11-11 Actualizar

ASTM D4454-85(2009) Historia

• 1985 ASTM D4454-85(2009) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía
• 1985 ASTM D4454-85(2002) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía
• 1997 ASTM D4454-85(1997) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía