ASTM D4454-85(2002) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía
La medición de las densidades bacterianas es generalmente el primer paso para establecer una relación entre las bacterias y otros procesos bioquímicos.5 Se sabe que el procedimiento clásico de recuento en placa subestima las densidades bacterianas, mientras que el procedimiento microscópico directo de epifluorescencia representa con mayor precisión el número total de bacterias no viables o inactivas y células viables en una muestra de agua. La técnica de reducción de INT-formazán con naranja de acridina proporciona información sobre las concentraciones totales de bacterias, así como sobre la proporción que respiran activamente y, por lo tanto, participan en procesos degradativos. La técnica de reducción de INT-formazán con naranja de acridina es cuantitativa y precisa. Este procedimiento es ideal para enumerar bacterias pelágicas y epibentónicas en todos los ambientes marinos y de agua dulce. El proceso se puede emplear en estudios de sondeo para caracterizar las densidades y actividades bacteriológicas de las aguas ambientales.1.1 Este método de prueba cubre la detección y enumeración de bacterias acuáticas mediante el uso de un procedimiento de recuento microscópico directo de epifluorescencia de naranja de acridina. Este método de prueba es aplicable a aguas ambientales y aguas potables.1.2 Ciertos tipos de desechos y otros microorganismos pueden emitir fluorescencia en frotis teñidos con naranja de acridina.1.3 El procedimiento descrito requiere un microbiólogo o técnico capacitado que sea capaz de distinguir las bacterias de otros cuerpos fluorescentes en la base de la morfología cuando se observa con mayores aumentos.1.4 El uso de luz brillante permite la diferenciación de bacterias individuales donde se deposita formazán reducido en los extremos polares.1.5 Se requieren aproximadamente 104 células/mL para la detección mediante este método de prueba.1.6 Tamaño de célula mínimo que permite la detección de depósitos de formazán está representado por bacterias de 0,4 m.21.7 Esta norma no pretende abordar los problemas de seguridad, si los hubiera, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso.
ASTM D4454-85(2002) Historia
1985ASTM D4454-85(2009) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía
1985ASTM D4454-85(2002) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía
1997ASTM D4454-85(1997) Método de prueba estándar para la enumeración simultánea de bacterias totales y respiratorias en sistemas acuáticos mediante microscopía