ASTM E2694-11
Método de prueba estándar para la medición de trifosfato de adenosina en fluidos para trabajar metales miscibles en agua

Estándar No.

ASTM E2694-11

Fecha de publicación

2011

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Estado

Remplazado por

ASTM E2694-16

Ultima versión

ASTM E2694-21

Alcance

Este método mide la concentración de ATP presente en la muestra. El ATP es un constituyente de todas las células vivas, incluidas las bacterias y los hongos. En consecuencia, la presencia de ATP es un indicador de contaminación microbiana total en los fluidos para trabajar metales. El ATP no está asociado con materia de origen no biológico. El método D4012 validó el ATP como sustituto de datos bacterianos cultivables (Guía E1326). Este método se diferencia del Método D4012 en que elimina las interferencias que históricamente han inutilizado las pruebas de ATP con fluidos orgánicos complejos como el MWF. La prueba de ATP proporciona resultados rápidos que reflejan la carga biológica total en la muestra. De este modo, reduce el retraso entre el inicio de la prueba y la captura de datos, de 36 h a 48 h (o más) necesarios para que las colonias cultivables se vuelvan visibles, a aproximadamente cinco minutos. Aunque los datos de ATP generalmente covarían con los datos de cultivo en MWF, diferentes factores afectan la concentración de ATP que aquellos que afectan la cultivabilidad. La cultivabilidad se ve afectada principalmente por la capacidad de los microbios capturados para proliferar en el medio de crecimiento proporcionado, en condiciones de crecimiento específicas. Se ha estimado que menos del 1 % de las especies presentes en una muestra ambiental formarán colonias bajo cualquier conjunto de condiciones de crecimiento. La concentración de ATP se ve afectada por: las especies microbianas presentes, los estados fisiológicos de esas especies y la carga biológica total (ver Apéndice X1). Un ejemplo del efecto de especie es que la cantidad de ATP por célula es sustancialmente mayor en los hongos que en las bacterias. Dentro de una especie, las células que son más activas metabólicamente tendrán más ATP por célula que las células inactivas. Cuanto mayor sea la carga biológica total, mayor será la concentración de ATP en una muestra. Existe la posibilidad de que el paso de enjuague (11.15) no elimine todas las sustancias químicas que pueden interferir con la reacción de bioluminiscencia (11.39). La presencia de tales interferencias se puede evaluar realizando una serie de pruebas de adición estándar como se describe en el Apéndice X3. Cualquier impacto de las sustancias químicas que interfieren se reflejará como sesgo en relación con los datos obtenidos de un fluido que no contiene sustancias químicas que interfieren.1.1 El método proporciona un protocolo para capturar, extraer y cuantificar el contenido de trifosfato de adenosina (ATP) asociado con los microorganismos que se encuentran en sustancias miscibles en agua. Fluidos para trabajar metales (MWF). 1.2 El ATP se mide mediante un ensayo enzimático de bioluminiscencia, mediante el cual se genera luz en cantidades proporcionales a la concentración de ATP en las muestras. La luz se produce y se mide cuantitativamente como unidades relativas de luz (RLU) que se convierten en comparación con un estándar de ATP y se calculan en pg de ATP/mL. 1.3 Este método es igualmente adecuado para su uso en el laboratorio o en el campo. 1.4 El método detecta concentraciones de ATP en el rango de 4,0 pg ATP/ml a 400.000 pg ATP/ml. 1.5 Siempre que puedan superarse las interferencias, la bioluminiscencia es un método fiable y probado para calificar y cuantificar el ATP. El método no diferencia entre ATP de diferentes fuentes, por ejemplo, de diferentes tipos de microorganismos, como bacterias y hongos. 1.6 Los valores indicados en SI deben considerarse estándar. 1.7 Esta norma no pretende abordar todos los problemas de seguridad, si los hay, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las regulaciones...

ASTM E2694-11 Documento de referencia

• ASTM D1129 Terminología estándar relacionada con el agua
• ASTM D4012 Método de prueba estándar para el contenido de trifosfato de adenosina (ATP) de microorganismos en el agua
• ASTM D4840 Guía estándar para ejemplos de procedimientos de cadena de custodia*， 2018-08-15 Actualizar
• ASTM D6161 Terminología estándar utilizada para procesos de microfiltración, ultrafiltración, nanofiltración y membrana de ósmosis inversa de flujo cruzado
• ASTM E1326 Guía estándar para evaluar pruebas microbiológicas no convencionales utilizadas para enumerar bacterias
• ASTM E1497 Práctica estándar para la selección y el uso seguro de fluidos de eliminación de metales miscibles en agua y de aceite puro*， 2023-04-01 Actualizar
• ASTM E177 Práctica estándar para el uso de los términos precisión y sesgo en los métodos de prueba ASTM
• ASTM E2523 Terminología estándar para fluidos y operaciones de trabajo de metales*， 2018-10-01 Actualizar
• ASTM E691 Práctica estándar para realizar un estudio entre laboratorios para determinar la precisión de un método de prueba

ASTM E2694-11 Historia

• 2021 ASTM E2694-21 Método de prueba estándar para la medición de trifosfato de adenosina en fluidos para trabajar metales miscibles en agua
• 2016 ASTM E2694-16 Método de prueba estándar para la medición de trifosfato de adenosina en fluidos para trabajar metales miscibles en agua
• 2011 ASTM E2694-11 Método de prueba estándar para la medición de trifosfato de adenosina en fluidos para trabajar metales miscibles en agua
• 2009 ASTM E2694-09 Método de prueba estándar para la medición de trifosfato de adenosina en fluidos para trabajar metales miscibles en agua