ASTM E1262-88(2013)
Guía estándar para la realización del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino

Estándar No.

ASTM E1262-88(2013)

Fecha de publicación

1988

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Estado

Remplazado por

ASTM E1262-88(2018)

Ultima versión

ASTM E1262-88(2018)

Alcance

2.1 El ensayo CHO/HGPRT detecta mutaciones directas del locus de hipoxantina-guanina fosforribosil transferasa (hgprt) ligada al cromosoma X (que codifica la enzima HGPRT) en células de ovario de hámster chino (CHO). Las células originalmente derivadas del tejido de ovario de hámster chino se exponen a un artículo de prueba y, siguiendo un régimen de cultivo celular apropiado, se monitorea a los descendientes de la población tratada original para detectar la pérdida de HGPRT funcional, presumiblemente debido a mutaciones. Como marcador genético se emplea la resistencia a un análogo de purina, 6-tioguanina (6TG) (o menos deseablemente, 8-azaguanina (8AG)). HGPRT cataliza la conversión del 6TG no tóxico en su derivado ribofosforilado tóxico. Por tanto, la pérdida de la enzima o de su actividad da lugar a células resistentes a la 6TG. 2.2 Debido a que HGPRT es una enzima de la vía de recuperación de nucleótidos de purina, la pérdida de la enzima no es un evento letal. En teoría, deberían ser detectables diferentes tipos de eventos mutacionales (sustituciones de bases, cambios de marco, deleciones, algunas lesiones de tipo cromosómico, etc.) en el locus hgprt. El ensayo CHO/HGPRT se ha utilizado para estudiar una amplia gama de mutágenos, incluidas radiaciones (2-4), una amplia variedad de sustancias químicas (1) y mezclas químicas complejas (5). 1.1 Esta guía destaca algunos de los conceptos biológicos más relevantes tal como se entienden actualmente y resume los aspectos técnicos críticos para el desempeño aceptable de los bioensayos tal como se perciben y practican actualmente. El ensayo de células de ovario de hámster chino/hipoxantina guanina fosforribosil transferasa (CHO/HGPRT) (1) 2 se ha aplicado ampliamente a la evaluación toxicológica de sustancias químicas industriales y ambientales. 1.2 Esta guía se concentra en los aspectos prácticos del cultivo celular, los procedimientos de mutagénesis, el análisis de datos, el control de calidad y la estrategia de prueba. El enfoque sugerido representa un consenso de los miembros del panel para la realización del ensayo. Debe entenderse, sin embargo, que estas son meras pautas generales y no deben seguirse sin el uso de un juicio científico sólido. Los usuarios del ensayo deben evaluar su enfoque en función de las propiedades de las sustancias que se van a probar y las preguntas que se deben responder. 1.3 La desviación de las directrices basadas en un juicio científico sólido no debería invalidar en modo alguno los resultados obtenidos. 1.4 Los valores indicados en unidades SI deben considerarse estándar. No se incluyen otras unidades de medida en esta norma. 1.5 Esta norma no pretende abordar todos los problemas de seguridad, si los hay, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso.

ASTM E1262-88(2013) Historia

• 2018 ASTM E1262-88(2018) Guía estándar para la realización del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino
• 1988 ASTM E1262-88(2013) Guía estándar para la realización del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino
• 1988 ASTM E1262-88(2008) Guía estándar para la realización del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino
• 1988 ASTM E1262-88(2003) Guía estándar para el rendimiento del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino
• 1996 ASTM E1262-88(1996) Guía estándar para el rendimiento del ensayo de mutación del gen de hipoxantina guanina fosforribosil transferasa de células de ovario de hámster chino