Al determinar la concentración detectable límite de una sustancia fluorescente, generalmente es necesario aumentar la escala de lectura de un instrumento fotoeléctrico hasta un punto en el que el ruido (es decir, fluctuaciones aleatorias del sistema) se vuelve evidente. Este ruido se superpondrá a la señal de la muestra. En espectroscopía de fluorescencia molecular, el límite de detección de la muestra estará determinado por la relación señal-ruido límite, S/N, donde la señal, S, es la diferencia entre las lecturas obtenidas con la muestra y las soluciones en blanco, y N. es el ruido cuadrático medio (rms) total. El límite de detección de la muestra vendrá dado por las lecturas del instrumento que den una señal igual a tres veces el valor rms del ruido. Nota 28212; Otros factores además del ruido que afectan la concentración de la muestra correspondiente al límite de detección incluyen: los anchos de banda espectrales de los monocromadores de excitación y emisión, la intensidad de la luz excitante que se puede concentrar en la muestra, la fracción de la fluorescencia recogida por el sistema de detección, el tiempo de respuesta del sistema de detección y la pureza del disolvente. El tamaño y la disposición del recipiente de muestra con respecto a los haces de luz también son importantes, ya que afectan tanto a la señal deseada como a la señal extraña que solo contribuye al ruido.1.1 Este método de prueba emplea la relación señal-ruido para determinar la sensibilidad. de un sistema de medición de fluorescencia en las pruebas del límite de detección (LOD) de sulfato de quinina dihidrato en solución. Los resultados obtenidos con sulfato de quinina dihidrato en solución son adecuados para especificar el rendimiento del instrumento en muestras que tienen bandas de excitación y fluorescencia de más de 10 nm a temperatura ambiente o cerca de ella. 1.1.1 Este método de prueba no está destinado a ser utilizado como (1) una prueba rigurosa del desempeño de la instrumentación, o (2), para intercomparar el desempeño cuantitativo de instrumentos de diferente diseño. La intercomparación del LOD entre instrumentos se expresa comúnmente como la relación entre la intensidad máxima de Raman del agua y el ruido cuadrático medio (rms) medido en un fluorómetro utilizando una longitud de onda de excitación de 350 nm. Este método de prueba utiliza el pico de excitación y emisión. longitudes de onda para el sulfato de quinina dihidrato en solución, que son aproximadamente 350 nm y 450 nm, respectivamente. 1.2 Este método de prueba se ha aplicado a sistemas de medición de fluorescencia que utilizan fuentes de excitación de baja energía sin láser. No hay garantía de que una iluminación extremadamente intensa no cause la fotodescomposición del compuesto sugerido en este método de prueba. Por esta razón, se recomienda que este método de prueba no se emplee indiscriminadamente con fuentes de luz de alta intensidad. Este método de prueba no pretende determinar cantidades mínimas detectables de otros materiales. Si este método de prueba se extiende para emplear otras sustancias químicas, el usuario debe tener en cuenta la posibilidad de que estas otras sustancias puedan sufrir descomposición o adsorción en los contenedores. 1.3 Un LOD típico para fluorómetros convencionales que utilizan este método de prueba es 1 ng de sulfato de quinina por ml. 1.4 La vida útil sugerida para una solución madre de 1 mg/ml de sulfato de quinina dihidrato es de tres meses, cuando se almacena en la oscuridad en un frasco de vidrio con tapón. 1.5 Los valores indicados en unidades SI deben considerarse estándar. No se incluyen otras unidades de medida en esta norma. 1.6 Esta norma no pretende abordar todos los problemas de seguridad, si los hay, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer s......
ASTM E579-04(2009) Historia
2023ASTM E579-04(2023) Método de prueba estándar para el límite de detección de fluorescencia de sulfato de quinina en solución
2004ASTM E579-04(2015) Método de prueba estándar para el límite de detección de fluorescencia de sulfato de quinina en solución
2004ASTM E579-04(2009) Método de prueba estándar para el límite de detección de fluorescencia de sulfato de quinina en solución
2004ASTM E579-04 Método de prueba estándar para el límite de detección de fluorescencia de sulfato de quinina en solución
1998ASTM E579-84(1998) Método de prueba estándar para el límite de detección de fluorescencia del sulfato de quinina