ASTM E1397-91(2008)
Práctica estándar para el ensayo de reparación de ADN de hepatocitos de rata in vitro

Estándar No.

ASTM E1397-91(2008)

Fecha de publicación

1991

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Estado

 2014-01

Ultima versión

ASTM E1397-91(2008)

Alcance

La medición de la reparación del ADN inducida químicamente es un medio para evaluar la capacidad de una sustancia química para alcanzar y alterar el ADN. La reparación del ADN es un proceso enzimático que implica el reconocimiento y la escisión del aducto químico del ADN seguido de la polimerización y ligadura de la cadena de ADN para restaurar la estructura primaria original del ADN (7). Este proceso se puede cuantificar midiendo la cantidad de timidina marcada incorporada al ADN nuclear de las células que no están en fase S y a menudo se denomina síntesis de ADN no programada (UDS) (8). Se han desarrollado numerosos ensayos para medir la reparación del ADN inducida químicamente en diversas líneas celulares y cultivos celulares primarios de origen tanto humano como de roedores (9). El ensayo primario de reparación del ADN de hepatocitos de rata desarrollado por Williams (10) ha demostrado ser particularmente valioso para evaluar la actividad genotóxica y la posible carcinogenicidad de sustancias químicas (11), (12). La actividad genotóxica a menudo es producida por metabolitos reactivos de una sustancia química. El ensayo de hepatocitos de rata in vitro proporciona un sistema en el que una célula metabólicamente competente es en sí misma la célula objetivo para medir la genotoxicidad. La mayoría de las otras pruebas de genotoxicidad a corto plazo emplean un homogeneizado de hígado de rata (S-9) para la activación metabólica, que difiere notablemente en muchos aspectos importantes de los patrones de activación y desintoxicación que realmente ocurren en los hepatocitos. Se encuentra disponible una extensa literatura sobre el uso de ensayos de reparación de ADN de hepatocitos in vitro (2, 3, 6, 13-28). 1.1 Esta práctica cubre un procedimiento típico y pautas para realizar el ensayo de reparación de ADN de hepatocitos in vitro en ratas. Los procedimientos presentados aquí se basan en protocolos similares que han demostrado ser confiables (1-6). 1.2 Las menciones de nombres comerciales o productos comerciales se entienden únicamente como ejemplos y no como respaldo. Se aceptan otros proveedores o fabricantes de productos equivalentes. 1.3 Los valores indicados en unidades SI deben considerarse estándar. No se incluyen otras unidades de medida en esta norma. 1.4 Esta norma no pretende abordar todos los problemas de seguridad asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso.

ASTM E1397-91(2008) Historia

• 1991 ASTM E1397-91(2008) Práctica estándar para el ensayo de reparación de ADN de hepatocitos de rata in vitro
• 1991 ASTM E1397-91(2003) Práctica estándar para el ensayo de reparación de ADN de hepatocitos de rata in vitro
• 1991 ASTM E1397-91(1998) Práctica estándar para el ensayo de reparación de ADN de hepatocitos de rata in vitro