Esta norma describe un método de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem para la determinación del contenido de melatonina en suero y es adecuado para la determinación de melatonina en suero. Método de extracción: transfiera con precisión 1 ml de muestra a un tubo de centrífuga de 15 ml, agregue 50 ml de solución de trabajo estándar de melatonina deuterada, agregue 4 ml de metanol y use un mezclador vórtex para oscilar y extraer durante 5 minutos. Utilice una centrífuga de alta velocidad y baja temperatura para centrifugar a 10000 g, 4 ℃ durante 5 minutos. Tome el sobrenadante y páselo a través de una membrana de filtro de 0,22 μm para medir la cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem. Puntos técnicos 1: como disolvente de melatonina, el metanol no afectará la estabilidad de la sustancia objetivo en la muestra, pero también puede desnaturalizar y precipitar la proteína en el suero. La operación experimental es simple y su tasa de recuperación puede alcanzar más del 60 %, que puede satisfacer bien las necesidades de detección de melatonina sérica. Punto técnico 2: La melatonina en suero se extrae con metanol, se mide con cromatografía líquida-espectrómetro de masas en tándem y se cuantifica mediante el método del estándar interno. Esta norma estipula que el límite de detección de melatonina es 0,01 μg/L y el límite de cuantificación es 0,05 μg/L; la tasa de recuperación de melatonina de este método estándar es: 60 ~ 120 %, según GB/T ?27404 cumple con la rango de tasa de recuperación a un cierto nivel de concentración; desviación relativa (RSD) ≤ 20%.
T/BDAS 002-2023 Historia
2023T/BDAS 002-2023 Determinación del contenido de melatonina en suero: cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem