T/CAICC 03-2021
Detección rápida de clorpirifos en verduras y frutas Inmunocromatografía con oro coloidal (Versión en inglés)

Estándar No.

T/CAICC 03-2021

Idiomas

Chino, Disponible en inglés

Fecha de publicación

2022

Organización

Group Standards of the People's Republic of China

Ultima versión

T/CAICC 03-2021

Alcance

Principio Este método adopta el principio de inmunocromatografía de inhibición competitiva. El clorpirifos de la muestra se extrae y se une al anticuerpo específico marcado con oro coloidal, inhibiendo la unión del anticuerpo al antígeno en la línea de prueba (línea T) de la tira reactiva, lo que produce un cambio en el color de la prueba. línea. Al comparar la profundidad del color de la línea de prueba y la línea de control de calidad (línea C), se juzga cualitativamente la muestra de clorpirifos. 4 Reactivos y materiales 4.1 Reactivos A menos que se indique lo contrario, todos los reactivos son de calidad analítica y el agua de laboratorio debe cumplir con los requisitos para agua secundaria en GB/T6682. 4.1.1 Metanol (CH3OH). 4.1.2 Solución de extracción: provista con la tira reactiva de inmunocromatografía de oro coloidal, o preparada según sus instrucciones. 4.1.3 Material de referencia: El nombre chino, el nombre en inglés, el número de registro CAS, la fórmula molecular y la masa molecular relativa del material de referencia de clorpirifos se muestran en la Tabla 1. La pureza es ≥98%. Tabla 1 Nombre chino, nombre en inglés, número de registro CAS, fórmula molecular, masa molecular relativa del material de referencia de clorpirifos Nombre chino Nombre en inglés Número de registro CAS Fórmula molecular Masa molecular relativa Clorpirifos 2921-88-2 C9H11Cl3NO3PS 350,6 Nota: O sustancia trazable equivalente. 4.2 Preparación de la solución 4.2.1 Solución madre estándar de clorpirifos (100 μg/mL): Pesar con precisión 1 mg de material de referencia de clorpirifos (4.1.3), colocarlo en un matraz volumétrico de 10 ml y disolverlo con metanol (4.1.1) y diluir hasta la marca, agitar bien y preparar una solución madre estándar de clorpirifos con una concentración de 100 μg/ml. Conservar protegido de la luz a 4 ℃, válido por 6 meses. 4.2.2 Solución de trabajo estándar de clorpirifos (1 μg/mL): Pipetear con precisión 0,1 ml de solución madre estándar de clorpirifos (100 μg/mL) (4.2.1), colocarla en un matraz volumétrico de 10 ml y enjuagar con metanol (4.1.1). Diluir hasta la marca, agitar bien y preparar una solución de trabajo estándar de clorpirifos con una concentración de 1 μg/ml. Nuevo para uso inmediato. 4.3 Materiales Tiras reactivas para inmunocromatografía de oro coloidal de clorpirifos, la matriz aplicable es verduras y frutas. Debe almacenarse en un lugar fresco, seco y oscuro. 4.3.1 Micropocillos marcados con oro (que contienen anticuerpos específicos marcados con oro coloidal). 4.3.2 Tarjeta de prueba. 5 Instrumentos y equipos 5.1 Balanza electrónica: La sensibilidad es de 0,01 g. 5.2 Pipeta: 10 μL ~ 200 μL, 100 μL ~ 1000 μL. 6 Pasos del análisis 6.1 Preparación de la muestra Seleccione una muestra nueva, limpie la superficie del suelo y córtela en trozos cuadrados de aproximadamente 1 cm para su uso posterior. 6.2 Extracción de muestra: Pese 2 g de muestra (con una precisión de 0,05 g) en un tubo de centrífuga, agregue 6 ml de solución de extracción (4.1.2), agite hacia arriba y hacia abajo durante 1 min, deje reposar durante 5 min. y luego El líquido transparente es el líquido de muestra que se va a analizar. 6.3 Pasos de medición: Pipetee 100 μL de la solución de muestra a analizar en el microporo marcado con oro (4.3.1), bombee 2 a 3 veces para mezclar uniformemente, incube a temperatura ambiente durante 3 minutos, pipetee 100 μL de la solución mezclada y agréguela a la tarjeta de prueba. el orificio de muestreo, reaccione a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de juzgar el resultado. Nota 1: Se recomienda seguir las instrucciones de la tira reactiva para los pasos de medición. Nota 2: Se recomienda utilizar un medidor de lectura para determinar el resultado. Para el uso específico del medidor de lectura, consulte el manual de instrucciones del instrumento. 6.4 Prueba de control de calidad Cada lote de muestras debe someterse a una prueba en blanco y a una prueba de control de calidad enriquecida al mismo tiempo. 6.4.1 Prueba en blanco: Pese la muestra en blanco y siga los pasos 6.2 y 6.3 de la misma manera que la muestra. 6.4.2 Para la prueba de control de calidad de adición, pese con precisión 2 g de la muestra en blanco (con una precisión de 0,05 g) en un tubo de centrífuga y agregue 40 μl de solución de trabajo estándar de clorpirifos (1 μg/ml) (4.2.2), realice la concentración de clorpirifos. de la muestra 0,02 mg/kg, y seguir los pasos 6.2 y 6.3 de la misma forma que la muestra. 7 Juicio de resultados 7.1 La medición del medidor de lectura debe operarse de acuerdo con las instrucciones del medidor de lectura, leer directamente y juzgar el resultado. 7.2 Juicio visual El resultado se juzga comparando la profundidad del color de la línea de control de calidad (línea C) y la línea de prueba (línea T). El diagrama esquemático del juicio visual se muestra en la Figura 1. 7.2.1 Si la línea de control de calidad no válida (línea C) no desarrolla color, independientemente de si la línea de prueba (línea T) desarrolla color, indica un funcionamiento incorrecto o la tira reactiva ha caducado y el resultado de la prueba no es válido. 7.2.2 Si el resultado positivo es que la línea de control de calidad (línea C) desarrolla color pero la línea de prueba (línea T) no desarrolla color o tiene un color más claro que la línea de control de calidad (línea C), indica que el El contenido de clorpirifos en la muestra es superior al límite de detección del método y se considera positivo. 7.2.3 Si la línea de control de calidad (línea C) del resultado negativo está coloreada y la línea de prueba (línea T) es más oscura que la línea de control de calidad (línea C) o es básicamente del mismo color que la línea de control de calidad ( Línea C), indica que la muestra contiene un contenido bajo de clorpirifos, por debajo del límite de detección del método y se consideró negativa. Figura 1 Diagrama esquemático del juicio visual 7.3 Requisitos de la prueba de control de calidad El resultado de la medición de la prueba en blanco debe ser negativo y el resultado de la medición de la prueba de control de calidad enriquecida debe ser positivo. 8 Confirmación del resultado Cuando el resultado de la prueba es positivo, debe confirmarse de acuerdo con los estándares del método especificados en GB 2763. 9 Indicadores de rendimiento 9.1 Límite de detección: 0,02 mg/kg. 9.2 Sensibilidad: ≥95%. 9.3 Especificidad: ≥90%. 9.4 Tasa de falsos negativos: ≤5%. 9.5 Tasa de falsos positivos: ≤10%. Nota: Consulte el Apéndice A para conocer el método de cálculo de los indicadores de desempeño. 10 Los demás reactivos, la información de las tiras reactivas y los pasos operativos descritos en este método son para comodidad de los usuarios del método y no están limitados al utilizar este método. Los usuarios del método deben utilizar reactivos y tiras reactivas probados que cumplan con los indicadores de rendimiento especificados en este método.

T/CAICC 03-2021 Historia

• 2022 T/CAICC 03-2021 Detección rápida de clorpirifos en verduras y frutas Inmunocromatografía con oro coloidal