T/GZCX 020-2022
Determinación del contenido de fenoles totales en Rosa roxburghii y sus productos. (Versión en inglés)

Estándar No.

T/GZCX 020-2022

Idiomas

Chino, Disponible en inglés

Fecha de publicación

2022

Organización

Group Standards of the People's Republic of China

Ultima versión

T/GZCX 020-2022

Alcance

4. El principio del método utiliza la reducibilidad de los polifenoles en condiciones alcalinas. Los polifenoles pueden reducir el molibdato de ácido fosfotúngstico a azul. La profundidad del azul se correlaciona positivamente con el contenido de polifenoles. El valor de absorbancia se mide a 760 nm y se cuantifica mediante el estándar externo. método. . 5 Reactivos 5.1 Reactivos A menos que se especifique lo contrario, utilice únicamente reactivos analíticamente puros y agua de primer grado especificada en GB/T6682. 5.1.1 Estándar de ácido gálico (C7H6O5, CAS: 149-91-7): pureza ≥98%. 5.1.2 Etanol anhidro (C2H6O). 5.1.3 Carbonato de sodio (Na2CO3). 5.1.4 Reactivo Folin-Fenol (Folin-Fenol, BR, 1mol/L). 5.2 Preparación de reactivos 5.2.1 Solución madre de sustancia de referencia de ácido gálico (0,1 mg/ml): Pesar con precisión 10 mg (con una precisión de 0,1 mg) de estándar de ácido gálico, agregar una pequeña cantidad de agua para disolver, transferir a un matraz volumétrico marrón de 100 ml , agregue agua para diluir hasta el volumen hasta la marca, agite bien y guárdelo en la oscuridad a 4°C. 5.2.2 Solución de concentración en serie estándar de ácido gálico: Mida con precisión 0,0 ml, 0,25 ml, 0,50 ml, 0,75 ml, 1,00 ml, 1,25 ml y 1,5 ml de solución madre de sustancia de referencia de ácido gálico (5.2.1) en un volumétrico marrón de 25 ml. matraz., diluir hasta completar el volumen con agua, agitar bien y almacenar a 4°C. Las concentraciones de serie estándar de ácido gálico son 0 μg/mL, 1,0 μg/mL, 2,0 μg/mL, 3,0 μg/mL, 4,0 μg/mL, 5,0 μg/mL y 6,0 μg/mL. Listo para usar. 5.2.Solución de carbonato de sodio al 312%: Pese 12 g de carbonato de sodio anhidro (con una precisión de 0,01 g), agregue la cantidad adecuada de agua para disolver, transfiera a un matraz volumétrico de 100 ml, agregue agua para completar el volumen hasta la marca y agite bien. 5.2.Extractante de etanol al 480%: Medir 80mL de etanol absoluto, colocarlo en un matraz aforado de 100mL, agregar agua para disolver y diluir hasta la marca. 6 Instrumentos y Equipos 6.1 Espectrofotómetro. 6.2 Máquina rompemuros de alta velocidad. 6.3 Extractor ultrasónico. 6.4 Centrífuga refrigerada de alta velocidad: velocidad 10000rpm. 6.5 Balanza analítica: sensibilidad 0,0001g. 6.6 Oscilador de vórtice. 6.7 Triturador de tejidos. 7 Pasos del análisis 7.1 Preparación de la muestra: Pele y quite las semillas de la pera espinosa fresca (3.1), bata con un machacador de pañuelos, mezcle uniformemente y reserve; retire la pera espinosa seca (3.2) y la pera espinosa en conserva (3.3). Si hay impurezas visibles, tritúrelas con un rompemuros de alta velocidad para convertirlas en polvo y déjelas a un lado; muela el polvo liofilizado de rododendro (3.4) y el polvo liofilizado de rododendro (3.5) de manera uniforme y reserve. 7.2 Extracción de muestra 7.2.1 Muestra sólida: Tome 0,5 ~ 2 g de la muestra de 7.1, pésela con precisión (con una precisión de 0,0001 g), colóquela en un tubo de centrífuga de 50 ml con tapón, agregue 5 ml de agua para infiltrar la muestra, agregue 30mL de solución de etanol al 80% y sonicar durante 90 minutos, agitar varias veces durante el proceso ultrasónico para mantener la fase sólida completamente dispersa. Después del ultrasonido, centrifugar (9000 rpm, 4 ℃) durante 5 minutos, filtrar, lavar el precipitado con agua, combinar el líquido de lavado y filtrar, agregar agua para ajustar el volumen a un matraz volumétrico de 50 ml y obtenerlo. 7.2.2 Muestras líquidas: Para muestras líquidas como jugo de rododendro (3.6) y jugo concentrado de rododendro (3.7), mida con precisión de 1 a 10 ml de la muestra, colóquela en un tubo de centrífuga tapado de 50 ml, agregue 30 ml de 80 %. solución de etanol y realizar un tratamiento ultrasónico durante 90 minutos. Después del ultrasonido, centrifugar (9000 rpm, 4 ℃) durante 5 minutos, filtrar, lavar el precipitado con agua, combinar el líquido de lavado y filtrar, agregar agua para ajustar el volumen a un matraz volumétrico de 50 ml y obtenerlo. 7.3 Curva de trabajo estándar Mida con precisión 1,0 ml de solución de concentración en serie estándar de ácido gálico (5.2.2) en un tubo de ensayo graduado de 25 ml, agregue 1,0 ml de reactivo LFolin-fenol de 1,0 mol, agite bien y deje reposar durante 5 minutos, luego agregar ácido carbónico al 12% Tomar 2,0 ml de solución de sodio (5.2.3), agregar agua hasta completar la marca, calentar en un baño de agua a 30°C durante 90 minutos y medir la absorbancia a 760 nm. Dibuje la curva estándar con la masa de ácido gálico (mg) en 25 ml de solución en abscisas y la absorbancia en ordenadas. 7.4 La prueba en blanco se realiza en paralelo con la medición de la muestra. Tome la misma cantidad de todos los reactivos y utilice los mismos pasos de análisis, pero no agregue la muestra. 7.5 Determinación de la muestra Mida con precisión 1 ml de la solución de extracción (7.2), colóquelo en un tubo de ensayo graduado de 25 ml, agregue 1,0 ml de reactivo 1,0 mol/LFolin-fenol, luego agregue 2,0 ml de solución de carbonato de sodio al 12 % (5.2 .3), y añadir agua. Ajustar el volumen a la escala, calentar en baño maría a 30°C durante 90 minutos y medir la absorbancia a 760 nm. Si el contenido de polifenoles de la muestra es alto (la absorbancia no está entre 0,1 y 0,8), se puede diluir adecuadamente antes del análisis y la medición. 8 Expresión de los resultados del análisis 8.1 El contenido fenólico total (calculado como ácido gálico) en muestras sólidas como peras frescas y peras secas se expresa como porcentaje (%) y se calcula de acuerdo con la fórmula (1). x=……………………(1) En la fórmula: x───Contenido fenólico total en la muestra (medido como ácido gálico); m───Masa de ácido gálico en la muestra detectada a partir de la curva estándar , la unidad es miligramo (mg); M─── masa de la muestra, la unidad es gramo (g); d─── factor de dilución de la muestra; los resultados del cálculo se mantendrán con dos decimales. 8.2 El contenido fenólico total (calculado como ácido gálico) en muestras líquidas como jugo original de tuna y jugo concentrado de pera se expresa como porcentaje (%) y se calcula de acuerdo con la fórmula (2): x=……………… …( 2) En la fórmula: x───Contenido fenólico total en la muestra (medido como ácido gálico); m───La masa de ácido gálico en la muestra detectada a partir de la curva estándar, en miligramos (mg); v── ─Volumen de la muestra, la unidad es mililitro (mL); d───Factor de dilución de la muestra; Los resultados del cálculo se mantendrán con dos decimales. 9 Precisión: En condiciones repetidas, la diferencia absoluta entre dos resultados de medición independientes obtenidos no supera el 10% de la media aritmética.

T/GZCX 020-2022 Historia

• 2022 T/GZCX 020-2022 Determinación del contenido de fenoles totales en Rosa roxburghii y sus productos.