T/FSSJ SYNY001-2020
Práctica Técnica de Producción de Desove Líquido de Auricularia auricula (Versión en inglés)

Estándar No.

T/FSSJ SYNY001-2020

Idiomas

Chino, Disponible en inglés

Fecha de publicación

2020

Organización

Group Standards of the People's Republic of China

Ultima versión

T/FSSJ SYNY001-2020

Alcance

Flujo del proceso de producción semilla madre → matraz agitado semilla líquida ↓ Preparación del material de cultivo → alimentación → esterilización → enfriamiento → inoculación → cultivo → fermentador medio de semilla líquida El medio de cultivo de semilla madre utiliza papas especificadas en A.1 en el Apéndice A Medio de agar dextrosa ( PDA) o medio integral de agar patata dextrosa (CPDA) especificado en A.2. El medio de cultivo de semillas líquido utiliza una fórmula adecuada de acuerdo con los requisitos de las especies de hongos negros y las materias primas locales (ver Apéndice B), y el pH inicial está estrictamente controlado. 8 Los requisitos de calidad de la semilla madre cumplen con las regulaciones sobre calidad de la semilla madre en GB 19169 y NY/T 1742. Producción de cepa líquida del matraz agitado 1 Dispensación y esterilización del medio El volumen del medio de cultivo de cepa líquida del matraz agitado es de 1/4 a 1/3 del volumen del recipiente y se esteriliza inmediatamente después de la dispensación. De acuerdo con los procedimientos operativos convencionales del esterilizador de vapor de alta presión, 0,1 Mpa ~ 0,12 Mpa (121 ℃ ~ 126 ℃), mantenido durante 25 minutos. El cultivo de semillas líquido en matraz agitado esterilizado se mantiene a una temperatura constante de 30 ° C ± 1 ° C en una incubadora durante 48 horas. Después de la observación, se confirma que no hay turbidez ni olor y se puede utilizar para cultivo de inoculación. . 2 Inoculación De acuerdo con los procedimientos operativos asépticos, corte el micelio madre inclinado en partículas de 2 mm a 4 mm, muévalas al medio de cultivo del matraz agitado e inocule de 1 a 3 partículas de micelio por cada 100 ml de medio de cultivo líquido. 3 Cultivo de cepas bacterianas La temperatura del cultivo es de 26 °C ± 1 °C, la humedad relativa del aire es del 55 % al 65 % y el cultivo se realiza agitando en la oscuridad. La frecuencia de oscilación del agitador alternativo es de 60 a 120 veces/min, y la frecuencia de oscilación del agitador giratorio es de 150 a 180 rpm. Verifique el estado de crecimiento todos los días y detecte rápidamente cepas no calificadas con turbidez, olor y espuma anormal. Después de dejar reposar el matraz agitado durante 1 minuto, el cultivo puede finalizarse cuando el volumen de las bolas de micelio represente más de 4/5 del volumen del medio de cultivo líquido.  Producción de cepa líquida del tanque fermentador 1 Inspección del sistema de filtración de aire. Antes de su uso, el elemento filtrante debe ser desmontado e inspeccionado. Debe estar libre de aceite, material y daños. Las paredes internas y externas de la carcasa deben estar libre de suciedad, brillante y limpio. Con un volumen de aire nominal, la eficiencia de filtración del elemento filtrante para partículas con un tamaño de partícula de 0,1 a 0,2 μm es superior al 99,99 % y la resistencia del aire es inferior a 280 pa. 2 Inspección y limpieza de tanques de fermentación.Comprobar que todas las válvulas, válvulas de seguridad y manómetros de los tanques estén en buen estado y funcionando correctamente. Enjuague el interior, el exterior y todas las válvulas del tanque con agua corriente para asegurarse de que no queden rincones muertos ni residuos de material de cultivo en la pared interior. 3 La esterilización por vaciado y esterilización del tanque de fermentación se debe realizar cuando se utiliza por primera vez, se contamina con bacterias, se deja por mucho tiempo o cuando se cambia de variedad. Para incubadoras con varillas eléctricas incorporadas, agregue agua hasta el 80% del volumen y caliente a 121°C durante 40 minutos. Para las incubadoras esterilizadas con vapor externo, la presión del vapor alcanza 0,1 Mpa ~ 0,12 Mpa (121 ℃ ~ 124 ℃) y se mantiene durante 40 minutos. 4 Agregue los materiales y ajuste el volumen. Revuelva uniformemente los materiales del medio preparado, viértalos o bombéelos al tanque de fermentación, agregue agua y ajuste al volumen requerido. La cantidad total de medio de cultivo alimentado es del 70% al 80% del volumen total del tanque. 5 La esterilización y el enfriamiento se realizan según el método de esterilización con vapor a alta presión. La presión en la incubadora alcanza 0,1 Mpa ~ 0,12 Mpa, la temperatura media alcanza 121 ℃ ~ 124 ℃ y el tiempo de retención es de 60 min ~ 90 min. Una vez completada la esterilización, el medio de cultivo se enfría entre 24°C y 28°C. Durante el proceso de enfriamiento, el aire filtrado debe reponerse en la incubadora a tiempo para evitar que la presión del tanque vuelva a cero. 6 La inoculación utiliza protección contra llamas para inocular, y la cantidad de inoculación es del 0,1% al 0,5% del medio de cultivo total en el tanque. 7. La tasa de ventilación del tanque de fermentación del cultivo es 1: 0,5~1,2 V/V (volumen de líquido de alimentación/volumen de aire) por minuto, la presión del tanque se ajusta a 0,02 Mpa ~ 0,04 Mpa y la temperatura del cultivo se ajusta a 24℃~ A 26°C, cultivado durante 7 a 10 días puede alcanzar el estándar de producto terminado de cepa líquida de hongo shiitake. Las variedades especiales están diseñadas específicamente según necesidades especiales. 8 Detección y determinación: Saque muestras del tanque de fermentación para analizarlas todos los días 3 días después del inicio del cultivo. Inspeccione de acuerdo con las características microscópicas de los métodos de inspección de micelio y moho bacteriano NY/T 1846. Si es anormal, drene el cultivo en el tanque, esterilícelo y reinicie la producción. Al final de la fermentación, el pH es de 4,5 a 5,5 y el peso de cada 100 ml de micelio líquido después de la centrifugación en seco es de 2,0 a 2,8 g/100 ml. El micelio esférico de las cepas líquidas calificadas de hongos negros es blanco y el filtrado es amarillo claro. El líquido bacteriano es ligeramente viscoso, con una gran cantidad de micelio esférico suspendido y distribuido uniformemente. Las bolas bacterianas son espesas, blancas y claras. Tiene el aroma único del cultivo líquido de hongos negros y no tiene olor peculiar. 9 Las cepas líquidas de los productos terminados almacenados deben usarse lo antes posible. En circunstancias especiales, una vez completado el cultivo, se debe introducir aire estéril en el tanque de fermentación, la presión del tanque se debe mantener entre 0,02 Mpa ~ 0,04 Mpa y la temperatura ambiente debe ser de 6 ℃ ~ 10 ℃. 24 horas.

T/FSSJ SYNY001-2020 Historia

• 2020 T/FSSJ SYNY001-2020 Práctica Técnica de Producción de Desove Líquido de Auricularia auricula