Las pruebas de control de calidad de productos de ADN amplificado de genoma completo incluyen principalmente dos aspectos: pruebas de concentración y pruebas de electroforesis. El producto de ADN debe tener una concentración no inferior a 30 ng/μL y una cantidad total de más de 1 μg después de la detección del Qubit antes de que pueda continuar el análisis de secuenciación; el rango de banda de electroforesis del producto de ADN debe ser superior a 250 pb y el límite superior no es más de 2000 pb, y la banda principal es de 750 pb. Una vez que las muestras pasan la prueba de control de calidad, ingresan a la construcción de la biblioteca. El importe inicial para la construcción de la biblioteca es de 300 ng. En la actualidad, la enzima de fragmentación del ADN bicatenario NEB se utiliza para romper la banda principal en pequeños fragmentos de ADN de 150-200 pb. Posteriormente, se realiza la purificación y el ADN purificado se somete a reparación de extremos, ligación de adaptadores, amplificación por PCR y construcción de biblioteca purificada. Una vez que la biblioteca pase la prueba cuantitativa BMG, se secuenciará en la computadora.
T/SZGIA 3-2018 Historia
2018T/SZGIA 3-2018 El estándar de secuenciación completa en técnicas de cribado genético preimplantacional