Las muestras se enriquecieron y cultivaron, y el líquido de enriquecimiento cultivado se recogió para la extracción de ADN. Utilizando el ADN como plantilla y la secuencia del gen bacteriano 16SrDNA como referencia interna, se diseñaron cebadores y sondas basados en las secuencias relativamente conservadas y altamente específicas del gen invA en Salmonella, el gen tlh de Vibrio parahaemolyticus y el gen ipaH de Shigella para transportar realizar la detección del objetivo.La amplificación por PCR de fluorescencia triple en tiempo real, según el valor de Ct, determina si la muestra contiene Salmonella, Vibrio parahaemolyticus y Shigella. Entre ellos, la detección de una reacción de referencia interna puede controlar si la reacción se desarrolla normalmente y evitar resultados falsos negativos.
T/SDAQI 043-2021 Historia
2021T/SDAQI 043-2021 Detección de salmonella, vibrio parahaemolyticus y shigella en piensos mediante PCR en tiempo real